諾博萊德 核糖體提取試劑盒

核糖體提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：P4936

產(chǎn)品名稱：核糖體提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：核糖體提取試劑盒

規(guī)格：

50T ; 100T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder P4936 核糖體提取試劑盒

適用樣本：動物細胞/組織

產(chǎn)品介紹

核糖體是細胞內(nèi)一種核糖核蛋白顆粒(ribonucleoprotein particle),主要由 RNA 和蛋白質構成, 其惟一功能是按照 mRNA 的指令將氨基酸合成蛋白質多肽鏈,所以核糖體是細胞內(nèi)蛋白質合成的分子機器。核糖體無膜結構，主要由蛋白質（40%）和 RNA（60%）構成核糖體按沉降系數(shù)分為兩類,一類（70S）存在于細菌等原核生物中,另一類（80S）存在于真核細胞的細胞質中。他們有的漂浮在細胞內(nèi)，有的結集在一起。

核糖體提取試劑盒可用于各種動物細胞和實體軟、硬組織樣本的核糖體的提取。

注：

試劑拆封后請盡快使用完，長期不用可以-20℃保存。

需自備試劑及設備

離心機、振蕩器、勻漿機/勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒、1×PBS 緩沖液、離心管、吸頭、一次性手套、細胞篩

使用方法（僅供參考）：

一、使用注意事項：

1. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

3. 實驗中所有液體以及器具均應該用 DEPC 處理。用 0.1%的 DEPC 處理 12 小時然后高壓。

4. 下游用于蛋白質類實驗的話可以不用 DEPC 處理。

5. 細胞最好采用新鮮收集的，或者收集后立即置于-80℃保存的樣本。

6. 最好使用標準 Dounce 勻漿器勻漿，如果沒有標準 Dounce 勻漿器，用普通玻璃勻漿器勻漿也可，但是核糖體回收率可能會下降。

二、細胞核糖體提取：

1. 取 1-2×10⁷個細胞，在 4℃，500-1000×g 條件下離心 5 分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細胞。

2. 用冷 PBS 洗滌兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

3. 加入 500μl-1ml 冷的試劑 A，置冰上 10 分鐘。

4. 用 Dounce 勻漿器勻漿 20-30 下。

5. 將勻漿液在 4℃，1000×g 條件下離心 5 分鐘。棄沉淀，收集上清。

6. 將上清在 4℃，20000×g 條件下離心 10 分鐘，棄沉淀，收集上清。

7. 將上清在 4℃，100000×g -120000×g 條件下離心 60 分鐘。棄上清，收集沉淀。

8. 在沉淀中加入 400μl 冷的試劑 B，混勻。

9. 在 4℃，100000×g -120000×g 條件下離心 60 分鐘。

10. 棄上清，沉淀用核糖體保存液重懸。

11. 即得到核糖體樣品，置冰箱-80℃凍存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

三、組織核糖體提取：

1. 取 50-100mg 新鮮動物組織樣本，用 PBS 洗滌干凈。

2. 用剪刀盡可能剪碎，用冷 PBS 洗滌兩次。

3. 加入 500μl-1ml 冷的試劑 A，置冰上 10 分鐘。

4. 用 Dounce 勻漿器充分勻漿 20-30 下，至無明顯固體團塊。然后在 4℃，1000×g 條件下離心 5分鐘。

5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管。

6. 在 4℃，20000×g 條件下離心 10 分鐘，棄沉淀，收集上清。

7. 將上清在 4℃，100000×g -120000×g 條件下離心 60 分鐘。棄上清，收集沉淀。

8. 在沉淀中加入 400μl 冷的試劑 B，混勻。

9. 在 4℃，100000×g -120000×g 條件下離心 60 分鐘。

10. 棄上清，沉淀用核糖體保存液重懸。

11. 即得到核糖體樣品，置冰箱-80℃凍存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

注意事項：

(1) 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得優(yōu)良實驗效果。

(2) 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

(3) 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

(4) 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

(5) 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

(6) 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

核糖體提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品訂購信息：

P4936  核糖體提取試劑盒  50T/100T