諾博萊德 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution

AO染色液(1mg/ml)   細胞凋亡檢測方法

產品貨號：CA9921

產品名稱：AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution

英文名稱：AO Stain Solution

產品規格：10ml

產品簡介：

儲存條件：2-8℃，避光，有效期6個月。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyderCA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution屬于三環雜芳香燃料，可以標記DNA、RNA，屬于異染性熒光染料。該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使核DNA和RNA染色。因此AO常用于細胞內DNA和RNA進行檢測。AO與核酸結合方式主要有：1、插入性結合，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，這種結合方式主要為AO與DNA的結合，其熒光發射峰為530nm，激發后呈綠色熒光；2、靜電吸引，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負電荷)產生靜電間的吸引結合，這種結合方式主要為AO與RNA的結合，其熒光發射峰為640nm，激發后呈紅色熒光，少量結合會呈桔黃色或桔紅色熒光。因此，AO嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色，與DNA單鏈或RNA結合時發桔黃色或橙紅色熒光。

AO染色液(1mg/ml)為儲存液，使用時應稀釋到合適濃度后使用。染色后在熒光顯微鏡下觀察，AO可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。AO使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。AO染色常與EB染色合用雙染，因EB只染死細胞使之產生桔黃色熒光，由此可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。

自備材料：

1、熒光顯微鏡

2、低速離心機

3、PBS

 4、細胞計數板

5、載玻片、蓋玻片

操作步驟(僅供參考)：

1、收集細胞(采用流式細胞儀檢測時，應先固定細胞)，用PBS清洗細胞1次，計數并調節細胞濃度至106/ml。

2、取適量的細胞懸液，加入AcridineOrangeStain(1mg/ml)，使AO終濃度為8.5～17μg/ml，輕輕混勻。

3、室溫避光染色15～20min，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細胞儀分析。

4、熒光顯微鏡下觀察(激發濾光片波長488nm，阻斷濾光片波長515nm)，計數并拍照。

染色結果

正常細胞：細胞被均勻染成黃綠色熒光

凋亡細胞：染色質濃縮，細胞核碎裂成點狀，被染成大小不一、致密濃染的綠色顆粒

注意事項：

1、Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜劑，較少單獨使用。

2、AO常與EB染色合用，可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。

3、如有低溫離心機進行離心效果更佳。

4、操作過程中應注意減少試劑暴露于強光下的時間。

5、試劑有一定毒性，請小心操作。

6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

AO染色液(1mg/ml)   細胞凋亡檢測方法

產品訂購信息

CA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution  10ml