諾博萊德 Masson三色染色試劑盒Masson’s Trichrome Stain Kit

Masson三色染色試劑盒 結(jié)締組織染色

產(chǎn)品貨號(hào)：G9128

產(chǎn)品名稱(chēng)：三色染色試劑盒，Masson’s Trichrome Stain Kit

產(chǎn)品規(guī)格：7*50ml / 7*100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱(chēng)：Masson三色染色試劑盒

英文名稱(chēng)：Masson’s Trichrome Stain Kit

規(guī)格：7*50ml ; 7*100ml

儲(chǔ)存條件：RT，避光保存，有效期1年。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder G9128 Masson三色染色試劑盒，Masson’s Trichrome Stain Kit產(chǎn)品介紹

結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維（collagen  fiber）是分布zui廣、含量最多的一種纖維。Masson三色染色又稱(chēng)馬松染色，是結(jié)締組織染色中zui經(jīng)典的一種方法，是膠原纖維染色quan威而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織，而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍(lán)色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson試劑盒的特點(diǎn)：◆染色穩(wěn)定；◆分化時(shí)間短，1-2秒；◆色彩清楚鮮艷；◆使用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；◆所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色。

操作步驟：(僅供參考)

一、石蠟切片：

1. 切片推薦厚度 3-8μm，石蠟切片常規(guī)脫蠟至蒸餾水。

2. （可選）臨用前 1：1 混合試劑 A1 和 A2 配制 Weigert 鐵蘇mu素染色液，滴加覆蓋切片染色 5-10min。

3. （可選）蒸餾水洗去多余染色液，滴加酸性分化液分化 5-15s，蒸餾水洗 30s。

4. （可選）滴加 Masson 藍(lán)化液返藍(lán) 3-5min，蒸餾水洗 30s。

5. 滴加麗春紅品紅染色液染色 5-10min。

6. 在上述操作過(guò)程中按蒸餾水：弱酸溶液=2:1 比例配置弱酸工作液，滴加弱酸工作液洗 30s。

7. 傾去多余液體，滴加磷鉬酸溶液處理 1-2min。滴加弱酸工作液洗 30s。

8. 傾去多余液體，滴加苯胺藍(lán)染色液染色 1-2min（見(jiàn)注意事項(xiàng) 11）。滴加弱酸工作液洗 30s。

9. 95%乙醇快速脫水 2-3s，無(wú)水乙醇脫水 2 次，每次 5-10s。

10. 二甲苯透明 2 次，每次 1-2min，中性樹(shù)膠封固。

二、冰凍切片

1. 切片推薦厚度 8-12μm，冰凍切片復(fù)溫復(fù)水后用 Bouin 固定液室溫過(guò)夜處理。（見(jiàn)注意事項(xiàng) 3）

2. 75%乙醇清洗切片至黃色wan全褪去。

3. 后續(xù)操作同石蠟切片第 2-10步。（見(jiàn)注意事項(xiàng)4）

注意事項(xiàng)：

1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，避免著色不均。本染色原理與結(jié)構(gòu)有關(guān)，須避免因組織切片過(guò)薄導(dǎo)致的不上色 和組織切片過(guò)厚導(dǎo)致的整體顏色發(fā)暗，因此推薦切片厚度 3-12μm。

2. 組織類(lèi)型和固定液選擇對(duì)染色結(jié)果有很大影響，因此不同樣本染色建議取少量切片進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。

3. 如無(wú) Bouin 固定液也可使用Carnoy 固定液Ⅱ代替進(jìn)行過(guò)夜處理，使用 Carnoy 固定液Ⅱ過(guò)夜處理 后 75%乙醇浸洗 2 次，每次 1min 后即可正常染色。

4. 冰凍切片由于細(xì)胞成分保留較完整，更容易吸附染料，因此建議使用弱酸工作液將苯胺藍(lán)染色液稀釋 2-4 倍后染色 0.5-1min，弱酸工作液洗 30s 來(lái)避免過(guò)度藍(lán)染。

5. 本染液采用 Weigert 鐵蘇mu素染細(xì)胞核，與常規(guī)蘇mu素核染色結(jié)果不一致屬正常現(xiàn)象，因?yàn)槿旧哪康闹饕谟趨^(qū)分膠原纖維和肌纖維，一般也可以省略該染色步驟。

6. 酸性分化液分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片薄厚，組織的類(lèi)別和新舊而定。

7. Masson 藍(lán)化液亦可自行購(gòu)買(mǎi)Scott 促藍(lán)液或配制 0.05-1%碳酸li水溶液予以替代。

8. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可購(gòu)買(mǎi)弱酸溶液或自行配置 0.5-1%乙酸溶液予以替代。若苯胺藍(lán)過(guò)染，可將第 7 步的弱酸清洗步驟改為蒸餾水清洗。

9. 磷鉬酸溶液易失效變色，正常呈淡黃色，如使用時(shí)已呈黃綠或發(fā)藍(lán)建議棄用。

10. 本試劑盒內(nèi)除試劑A、F 外試劑均可循環(huán)使用，循環(huán)次數(shù)按照0.8-1ml/切片計(jì)算。

11. 苯胺藍(lán)染色時(shí)間根據(jù)組織膠原纖維多少自行調(diào)整，通常含膠原纖維多的組織上色較快，反之則上色較慢需延長(zhǎng)染色時(shí)間。

12. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Masson三色染色試劑盒 結(jié)締組織染色

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