諾博萊德 總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

總蛋白提取試劑盒(蛋白組實驗適用)常備現貨

產品貨號：P4901

產品名稱：總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

產品規格：50T/100T

產品簡介：

中文名稱：總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P4901總蛋白提取試劑盒(蛋白組實驗、質譜適用)適用于從各種原代或傳代動物細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等動物組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。本產品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質譜峰漂移，因此使用本產品提取的蛋白樣品可以用于質譜(MassSpectrometry,MS)檢測和分析，蛋白質組學(proteomics)等相關研究。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

適用樣本：動物細胞/組織

使用前請注意：

1. 蛋白提取液A2、蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，

變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產品介紹：

蛋白提取試劑盒（蛋白質組學實驗適用）適用于從各種原代或傳代動物細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等動物組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。

本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。

本產品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質譜峰漂移，

因此使用本產品提取的蛋白樣品可以用于質譜（Mass Spectrometry, MS）檢測和分析，蛋白質

組學（proteomics）等相關研究。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，

離心管、吸頭、一次性手套。

產品特點：

1. 使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。

2. 將蛋白提取的時間縮短至30min-1h。

3. 含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。

4. 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

5. 總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白，又可結合釋出的蛋白

防止沉淀。

6. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含5種

獨立的蛋白酶抑制劑Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬an酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

操作步驟：

一、使用注意事項

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得優良實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗 并che底清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

7. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

8. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

9. 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

二、細胞樣本蛋白提取

1. 提取液制備：

將試劑A1和試劑A2混合，配成蛋白提取液A，充分混勻備用。

每500μL蛋白提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

2. 收集細胞，在4℃，2000×g 條件下離心5-10min，小心吸取培養基，盡可能吸干。

3. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4. 每5×106

-1×107個細胞（大約50mg細胞/50μL細胞壓積）中加入500μL冷的總蛋白提取液，

吹打混勻后，在4℃條件下振蕩20-30min，至細胞充分裂解，無明顯細胞沉淀。

5. 在4℃，12000×g條件下離心15min。

6. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到細胞總蛋白。

7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或用于下游實驗。

8. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

三、組織樣本總蛋白提取

1. 提取液準備：

將試劑A1和試劑A2混合，配成蛋白提取液A，充分混勻備用。

每500μL蛋白提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

2. 取50-100mg組織樣本，用PBS洗干凈，然后用手shu剪dao盡可能剪碎，加入500μL總蛋白提

取液A，用組織勻漿器/勻漿機勻漿至無明顯肉眼可見固體。

3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩20-30min。

4. 在4℃，12000×g條件下離心15min。

5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到組織總蛋白。

6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

7. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

常見問題分析：

1. 蛋白濃度低?

處理部分樣本時可能沒有裂解wan全，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間

即可。最好在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2. 用什么方法定量蛋白?

建議用BCA法。

3. 提取的蛋白具有活性嗎?

本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互

作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并

che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

總蛋白提取試劑盒(蛋白組實驗適用)常備現貨

產品訂購信息：

P4901  總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）  50T/100T