諾博萊德 細菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit

細菌活力/毒性檢測試劑盒   蛋白提取

產品貨號：P5143

產品名稱：細菌活力/毒性檢測試劑盒細菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit

產品規格：20T/100T

產品簡介：

英文名稱：Live/Dead Bacteria Staining Kit

規格：20T ; 100T

儲存條件：-20℃ 避光保存。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P5143 細菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit

產品簡介:

試劑盒包含兩種熒光染料，NucGreen是綠色核酸染料，可染色活細菌和死細菌;EthD-III是紅色核酸染料，僅染色細胞膜受損的死細菌。將NucGreen和EthD-II共同使用，具有鑒別細菌死活的能力。完整細胞膜的細菌呈現綠色，而具有受損細胞膜的細菌在不同通道下可分別呈現綠色和紅色。

細菌活力的常見標準是在合適的營養培養基中繁殖的能力，稱為生長測定。本試劑盒通常與在液體或固體培養基中的生長測定結果有著很好的一致性。但，在某些條件下，膜損傷的細菌可能會在營養培養基中恢復并繁殖，而這種細菌在本測定中會被認定死菌。相反，一些具有完整膜的細菌可能無法在營養培養基中繁殖，但在本測定中會被認定活菌。因此，若本試劑盒檢測結果和細菌生長測定之間有較大的差異，應考慮上述可能。

光譜特性:

NucGreen: Ex/Em: 503/530nm(結合DNA)

EthD-III:Ex/Em: 530/620nm(結合DNA)

產品使用（僅供參考）：

以 Esc.coli 為例熒光鏡檢

(1) 在合適的液體培養基中培養細菌至對數生長晚期。

(2) 向 EP 管中加入1mL 的菌液，5,000g 離心 15min。

(3) 去除上清液，加入1mL的0.85%NaCl溶液重懸細菌。

(4) 5,000g 離心 15 min，去除上清，加入1mL的0.85%NaCl溶液重懸細菌。重復一次。

(5) 將菌懸液密度調整到 108個細菌/mL（OD670≈0.03）。

(6) 配制染色工作液：取1μL的NucGreen 和2μL的 EthD-III，充分混勻后，加入8μL的0.85%NaCl溶液。

(7) 取1mL菌懸液，加 10μL 的染色工作液。充分混合，室溫避光孵育15min。

(8) 染色結束后，取10μL菌懸液滴加在潔凈的載玻片上，蓋玻片壓片后盡快觀察拍照，避免干片后熒光猝滅。

(9) 熒光顯微鏡成像：綠色熒光可使用 FITC適用濾光片觀察，紅色熒光可使用PI適用濾光片觀察。

注意事項

(1) 若使用孔板檢測，可靜置 10 min 后留少量菌液成像，能有效降低背景。

(2) 為更接近真實結果，Merge 圖片時建議保持紅色熒光與綠色熒光亮度一致。

(3) 在對細菌染色之前，必須注意除去生長介質的殘留。核酸和其他培養基組分可能會以某種方

式結合染料，導致不可接受的染色變化。不建議使用磷酸鹽（PBS）緩沖液，以免降低染色效率。

(4) 正式實驗前應依據不同菌株適當調整染料用量及濃度。一般最好使用能夠提供充足信號的zui低染料濃度。

(5) 本產品僅用于科研。

細菌活力/毒性檢測試劑盒   蛋白提取

產品訂購信息：

P5143  細菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit  20T/100T