諾博萊德 植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒 Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit

植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：BC9303

產(chǎn)品名稱：植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒 Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品簡介：

自備試劑：該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑，詳情見網(wǎng)站說明書

中文名稱：植物氨態(tài)氮檢測試劑盒

英文名稱：Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit

別名：植物氨態(tài)氮試劑盒 植物氨態(tài)氮測試盒

規(guī)格：100T/96S

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

測定意義：氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素，自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉(zhuǎn)化作用。空氣中的氮?dú)獗还痰⑸锛爸参锱c微生物的共生體固定成氨態(tài)氮，經(jīng)過硝化微生物的作用轉(zhuǎn)化成硝態(tài)氮，后者被植物或微生物同化成有機(jī)氮化物，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。

測定原理：α-氨基酸與水合茚三酮溶液一起加熱，經(jīng)氧化脫氨變成相應(yīng)的α-酮酸，酮酸進(jìn)一步脫羧變成醛，水合茚三酮則被還原，在弱酸環(huán)境中，還原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反應(yīng)， 縮合生成藍(lán)紫色物質(zhì)，在580nm處有特征吸收峰。

需要的儀器，耗材：天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

產(chǎn)品說明：

氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素。氨態(tài)氮進(jìn)入植物細(xì)胞后形成氨基酸或酰胺，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。

氨基酸的a-氨基可與水合茚三酮反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物，在570nm有特征吸收峰;通過測定570nm吸光度，來計算氨基酸含量。

技術(shù)指標(biāo)：

最di檢出限：24.2μg/mL

線性范圍：25-400μg/mL

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、無水乙醇(>98%，AR)、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

按照質(zhì)量(g)：提取液體積(mL)為1：5~10的比例(建議稱取約0.1g，加入1mL提取液)加入提取液，室溫勻漿后于25℃，12000g離心10min，取上清待測。

二、測定步驟

1.分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至570nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。

2.將1000μg/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液用提取液分別稀釋為400、300、200、100、50、25 μg/mL。

充分混勻后蓋緊瓶蓋封口膜封口(防止爆蓋)，置于沸水浴中保溫10min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，將測定管8000rpm離心5min后取上清，吸取200μL于微量玻璃比色皿或者96孔板中，于570nm測定吸光值。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。計算△A=A測定管-A空白管，AA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。

三、植物氨態(tài)氮含量計算

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各個氮標(biāo)準(zhǔn)液為橫坐標(biāo)，其對應(yīng)的△A標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將△A帶入方程中，得到x(μg/mL)。

2.氨態(tài)氮含量的計算：

(1)按樣本質(zhì)量計算：氨態(tài)氮含量(μg/g質(zhì)量)=xxV提取÷W=x÷W

(2)按蛋白濃度計算：氨態(tài)氮含量(μg/mg prot)=xxV提取+(CprxV提取) =x÷Cpr

W：樣本質(zhì)量，g;Cpr：蛋白濃度，mg/mL;V提取：樣本提取液總體積，1mL。

植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品訂購信息：

BC9303植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒 Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit 100T/96S