諾博萊德 酸性磷酸酶染色試劑盒偶氮偶聯(lián)法 酶類染色

NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯(lián)法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)

產(chǎn)品貨號(hào)：G9279

產(chǎn)品名稱：酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯(lián)法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)

產(chǎn)品規(guī)格：4*2ml / 4*10ml / 4*20ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱:酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯(lián)法)

英文名稱:Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s/Azo Coupling Method)

規(guī)格:4*2ml ; 4*10ml ; 4*20ml

儲(chǔ)存條件:-20℃，避光保存，有效期6個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯(lián)法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)產(chǎn)品介紹

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，所以常作為溶酶體標(biāo)志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi)。各種動(dòng)物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5～5.5。酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)以萘酚AS-BI為底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。對(duì)某些酸性磷酸酶來(lái)講，Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類也都是抑制劑，Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細(xì)胞涂片、冰凍切片等，亦可用于石蠟切片。

操作步驟：(僅供參考)

 (一) 樣本處理：

1、 細(xì)胞涂片：取新鮮全血或骨髓制備涂片，推玻片于載玻片保持30度，置于血液或細(xì)胞滴液的正前方，稍往后移與血液或細(xì)胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開(kāi)，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動(dòng)至均勻鋪開(kāi)為止，自然晾干。

2、 貼壁培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞爬片：吸去培養(yǎng)基，1×PBS清洗3-4次，瀝去多余水分。取出細(xì)胞爬片。

3、 冰凍切片：從冰箱取出放置恢復(fù)室溫，浸入蒸餾水清洗1-2min，瀝去多余水分。

4、 石蠟切片：石蠟切片脫蠟5-10min，重復(fù)一次。無(wú)水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min，蒸餾水浸洗2min，瀝去多余水分。

(二) 染色孵育：

1、 使用2-8℃預(yù)冷的ACP固定液固定30s-3min，多數(shù)情況下30-60s即可。

2、 蒸餾水洗，瀝去多余水分(不宜過(guò)分干燥)。

3、 （切片處理）滴加ACP孵育液覆蓋切片，置于濕盒內(nèi)37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

4、 （貼壁細(xì)胞）滴加 ACP孵育液覆蓋細(xì)胞，置于37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

5、 復(fù)染：蘇木素或甲基綠復(fù)染液染色2-3min。如選用蘇mu素染色液復(fù)染，染色后須自來(lái)水返藍(lán)10min或1×PBS返藍(lán)3-5min。

(三) 封片觀察：

1、 （切片處理）蒸餾水稍洗，瀝去多余水分，滴加水性封片劑封片后鏡檢觀察。

2、 （貼壁細(xì)胞）蒸餾水稍洗，可帶水或1×PBS鏡下觀察。

注意事項(xiàng)：

1.    該染色試劑盒為酶活原位染色試劑盒，反應(yīng)底物和染料易失效，收到產(chǎn)品后建議第一時(shí)間根據(jù)說(shuō)明書(shū) 描述溫度妥善保存。

2.    對(duì)冰凍切片染色時(shí)，應(yīng)減少切片在室溫暴露的時(shí)間。

3.    酶活易受多種因素影響導(dǎo)致衰減或消失。建議樣本新鮮取材，使用預(yù)冷固定液在2-8℃冰箱固定，時(shí) 間不宜超過(guò)24h。包埋時(shí)推薦使用低熔點(diǎn)蠟（52-56℃），避免熱失活。

4.    為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 酸性磷酸酶染色試劑盒偶氮偶聯(lián)法 酶類染色

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NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯(lián)法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method) 4*2ml / 4*10ml / 4*20ml