諾博萊德 抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒 抗逆系列

產品貨號：BC9013

產品名稱：抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

產品規格：100T/96S

產品簡介：

中文名稱：抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒

英文名稱：Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

別名：抗壞血酸含量測定試劑盒 AsA Kit 抗壞血酸（AsA）含量測定試劑盒 抗壞血酸（AsA）含量測試盒

規格：100T/96S

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder BC9013抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

AsA又稱維生素C。AsA是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細胞中最重要的抗氧化劑，AsA在保護葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用，也是衡量農作物產品品質的重要指標之一。

抗壞血酸氧化酶（AAO）催化AsA氧化生成DHA，通過測定AsA的氧化速率，即可計算出AsA含量。

自備儀器和用品： 研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器和蒸餾水。

產品說明:

AsA又稱維生素c。AsA是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細胞中最重要的抗氧化劑，AsA在保護葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用，也是衡量農作物產品品質的重要指標之一。

抗壞血酸氧化酶(AAO)催化AsA氧化生成DHA，通過測定AsA的氧化速率，即可計算出AsA含量。

技術指標:

最di檢出限:0.7539μmol/L

線性范圍:6.25-1400 μmol/L

注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰、低溫離心機、微量石英比色皿/96孔UV板、可調式移液器、蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻)

1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心20min，取上清置冰上待測。

2、細菌、細胞:按照細胞/細菌數量(104個):試劑一體積(mL)為500-1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一)，冰浴超聲波破碎細胞/細菌(功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min):8000g，4℃離心20min，取上清液置冰上混勻待測。

3、血清等液體:直接測定。

二、測定步驟

1、紫外分光光度計/酶標儀預熱30min，調節波長到265nm，分光光度計蒸餾水調零。

2、試劑二在25C水浴鍋中預熱30min以上。

3、標準管:依次在微量石英比色皿/96孔UV板中加入20μL標準液、160μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于265nm測定，記錄10s和130s的吸光值A1和A2。△A標準管=A1-A2。

4、測定管:依次在微量石英比色皿/96孔UV板中加入20μL上清液、160μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于265nm測定，記錄10s和130s的吸光值A3和A4。AA測定管=A3-A4。

三、AsA含量計算公式

1、按蛋白濃度計算:

AsA含量(nmol/mg prot) =(C標準液xΔA測定管+ΔA標準管xV樣)+(CprxV樣)=400*ΔA測定管+ΔA標準管+Cpr

2、按樣本質量計算:

AsA含量(nmol/g質量)=(C標準液xΔA測定管÷ΔA標準管xV樣)+(WxV樣+V樣總)

=400xΔA測定管÷△A標準管÷W

3、按細胞/細菌數量計算:

AsA含量(nmol/104cell)=(C標準液xΔA測定管+ΔA標準管xV樣)+(細胞數量xV樣+V樣總)

=400xΔA測定管+△A標準管+細胞數量

4、按液體體積計算:

AsA含量(nmol/mL)=(C標準液xΔA測定管+ΔA標準管xV樣)÷V樣=400xΔA測定管÷ΔA標準管

C標準液:標準液的濃度，400μmol/L=400nmol/mL:V樣總:上清液總體積，1.0mL;V樣:加入反應體系中上清液體積，0.02mL:Cpr:樣本蛋白濃度，mg/mL:W:樣本質量，g;細胞/細菌數量:以104為單位計量，萬。

注意事項:

1、試劑三和標準品現配現用，配制好的4℃保存，3天內使用完。

2、如果樣本初始吸光值大于1.4，建議將樣本用試劑一稀釋后進行測定。

抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒 抗逆系列

產品訂購信息：

BC9013抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit 100T/96S