超氧陰離子清除能力試劑盒說明書

微量法 100T/96S

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等，使其交鏈或者斷裂，引起細胞結構和功能的破壞，與機體衰老和病變有很密切的關系，清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理：

AP-TEMED 系統產生超氧陰離子，與鹽酸羥胺反應生成 NO2－，NO2－與對氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物，在 530nm 處有特征吸收峰，樣品對超氧陰離子的清除能力與 530nm 的吸光值呈負相關。

超氧陰離子清除能力試劑盒   抗氧系列

組成：

自備儀器和用品：

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。

樣品處理：

1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，10000g 離心 10min，取上清置于冰上待測。

2. 細胞：按照細胞數量（10⁴ 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 4℃，10000g離心 10min，取上清置于冰上待測。

3. 培養液或其它液體：直接檢測。

粉劑藥物可配制成相同濃度，比如 1mg/ml

測定操作表：

注意：對照管只需測定一次。

計算公式:

超氧陰離子清除率 I%= A對照管- A測定管′100%

A對照管

注意事項：

1. 試劑一 4℃可保存 2 個月，配制好的試劑二 4℃可保存一周，建議實驗前配制，并盡快使用。

2. 樣品處理完后立即進行測定，或者低溫保存不超過 24 小時。

超氧陰離子清除能力試劑盒   抗氧系列